海藻酸钠采用什么方法灭菌

1. 海藻酸钠的凝胶原理是什么

海藻酸钠遇到钙离子可迅速发生离子交换，生成凝胶。利用这种性质，将海藻酸盐溶液滴入含有钙离子的水溶液中可产生海藻酸钙胶球，使用喷嘴，可制造出凝胶纤维；

将含有钙离子的水溶液加入海藻酸盐溶液，可生成凝胶冻。海藻酸钠与钙离子形成的凝胶具有热不可逆性。

(1)海藻酸钠采用什么方法灭菌扩展阅读：

海藻酸钠是从褐藻类的海带或马尾藻中提取碘和甘露醇之后的副产物，其分子由β-D-甘露糖醛酸（β-D-mannuronic，M）和α-L-古洛糖醛酸（α-L-guluronic，G）按（1→4）键连接而成。海藻酸钠的水溶液具有较高的黏度，已被用作食品的增稠剂、稳定剂、乳化剂等。

海藻酸钠是无毒食品，早在1938年就已被收入美国药典。海藻酸钠含有大量的—COO－，在水溶液中可表现出聚阴离子行为，具有一定的黏附性，可用作治疗黏膜组织的 药物载体。

在酸性条件下，—COO－转变成—COOH，电离度降低，海藻酸钠的亲水性降低，分子链收缩，pH值增加时，—COOH基团不断地解离，海藻酸钠的亲水性增加，分子链伸展。

因此，海藻酸钠具有明显的pH敏感性。海藻酸钠可以在极其温和的条件下快速形成凝胶，当有Ca2+、Sr2+等阳离子存在时，G单元上的Na+与二价阳离子发生离子交换反应，G单元堆积形成交联网络结构，从而形成水凝胶。

海藻酸钠形成凝胶的条件温和，这可以避免敏感性药物、蛋白质、细胞和酶等活性物质的失活。由于这些优良的特性，海藻酸钠已经在食品工业和医药领域得到了广泛应用。

优势

海藻酸钠作为饮料和乳品的增稠剂，在增稠方面有独特的优势：海藻酸钠良好的流动性，使得添加后的饮品口感柔滑；并且可以防止产品消毒过程中的黏度下降现象。在利用海藻酸钠作为增稠剂时，应尽量使用分子量较大的产品，适量添加Ca。可以大大提高海藻酸钠的黏度。

海藻酸钠是冰激凌等冷饮的高档稳定剂，它可使冰淇淋等冷饮食品产生平滑的外观、柔滑的口感。由于海藻酸钙可形成稳定热不可逆凝胶，因而在运输、储藏过程中不会变粗糙（冰晶生长），不会发生由于温度波动而引起的冰淇淋变形现象；

同时这种冰淇淋食用时无异味，既提高了膨胀率又提高了融点，使得产品的质量和效益都有显着提高。产品口感柔滑、细腻、口味良好。添加量较低，一般为1-3%，国外添加量为5-10%。

海藻酸钠作为乳制品及饮料的稳定剂，稳定的冰冻牛乳具有良好的口感，无粘感和僵硬感，在搅拌时有粘性，并有迟滞感。

2. 关于海藻酸钠得问题 急急急！！！ 100分悬赏

海藻酸钠可以做石膏类塑型产品,可能是碰到金属离子就凝固了.
你排查一下分散料吧,有没有重钙\金属颜料\\\\?
以下资料对你可能有用:
牙科印模料
过去牙科印模主要用橡胶、石膏等混合物，近年来已被海藻酸钠印模料代替，海藻酸钠印模具有操作简便， 印出的齿形准确等优点。海藻酸钠印模料与凝固剂分装两包，使用时将两者用水调合，数分钟后即可凝固成型。
印花浆
海藻酸钠用作经纱上浆、整理浆、印花浆等已有悠久的历史，但主要用在印花浆方面。海藻酸钠用作活性染 料色浆，具有独特性能。纤维和活性染料进行化学反应，将染料固定在纤维上，在染色过程中所用印花浆应 不干扰或参与化学反应键合。若色浆参与反应，就会固定在纤维上，这就造成染过的纤维手感发硬，变脆、 色泽不好。当使用海藻酸钠作印花浆时，既不影响活性染料与纤维的染色过程，同时印出花纹清晰、鲜艳、 给色量高，手感好。不仅适合于棉布印色，也适用于羊毛、丝、合成纤维的印花。
中等粘度和低粘度的海藻酸钠都适用于从筛网式印花到滚筒式印花色浆的要求。实际上用低粘度的海藻酸钠 制备印花浆较稳定，这使制备较高含量的印花浆成为可能，这种印花浆可导致在干燥过程中产生致密的膜， 使着色率增加。

3. 海藻酸钠固定化酶成败关键

A、利用固定化酶降解水体中有机磷农药，纯粹的化学反应，不需要提供营养条件，只需适宜的温度和PH值即可，A错误；
B、影响固定化酵母细胞实验成败的关键在于配制海藻酸钠溶液，B错误；
C、如果提取动物细胞中的DNA和蛋白质可以用蒸馏水涨破细胞，但是如果用植物细胞来提取DNA，那么用蒸馏水就无法涨破细胞，C错误；
D、检测土壤中细菌总数的实验过程中需要严格的灭菌处理，防止影响实验的结果，D正确．
故选：D．

4. 溶解海藻酸钠最好采用什么或什么办法怎么溶解海藻酸钠

1、先用分散剂分散再溶解、可以溶解快一些。海藻酸钠易溶于水,只是块状的海藻酸钠溶解速度较慢,可以在溶解前使海藻酸钠变成粉末,为加速溶解,可采用热水溶解,并在溶解过程中不断搅拌。
2、海藻酸钠是从褐藻类的海带或马尾藻中提取碘和甘露醇之后的副产物，其分子由β-D-甘露糖醛酸（β-D-mannuronic，M）和α-L-古洛糖醛酸（α-L-guluronic，G）按（1→4）键连接而成。海藻酸钠的水溶液具有较高的黏度，已被用作食品的增稠剂、稳定剂、乳化剂等。海藻酸钠是无毒食品，早在1938年就已被收入美国药典。海藻酸钠含有大量的—COO－，在水溶液中可表现出聚阴离子行为，具有一定的黏附性，可用作治疗黏膜组织的药物载体。在由于优良的特性，海藻酸钠已经在食品工业和医药领域得到了广泛应用。

5. 生物选修1细胞的固定化 海藻酸钠是多孔性载体材料，在制作载体的时候，是先形成孔还是加了酵母菌液后再

见别人做过，记得是这样的。
先将海藻酸钠按需要量放在水里，加热，让海藻酸钠溶解在水中，调配好PH值，灭菌。冷却到合适的温度。
配制好氯化钙溶液（浓度忘了），灭菌后冷却。在无菌操作台上，把灭菌的氯化钙溶液倒入烧杯中，放入小搅拌棒，把烧杯到电磁搅拌器上。
将酵母菌液（或别的菌液）加入到海藻酸钠液里，混合均匀，用不带针头的注射器吸取海藻酸钠菌液，一滴一滴地滴入氯化钙溶液中，同时开动电磁搅拌器。海藻酸钠菌液在氯化钙溶液中冷却凝固，并在钙离子作用下，形成具有一定强度的圆球形凝胶。
固定化细胞就做好了。

6. 海藻酸钠怎样消毒,在生物细胞培养固定细胞

放在热水中溶解，溶解效果不好，但会成团状物
海藻酸钠是增稠剂最好用去离子水溶解，但清水也可以。关键是虽然搅拌，一般建议你放在清水沉淀几天再用，绝对没问题。而且不存在团状物。

7. 反硝化细菌主要用于处理怎样的水质问题

摘要

本发明公开了一种好氧反硝化细菌及其在污水处理中的应用，申请人通过富集从湿地中筛选出一种好氧反硝化细菌，施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，CCTCC NO：M2013488。该细菌可用于处理高NO3-的废水，最高去除率可达99.6%，且无亚硝态氮的累积，并可同时去除有机废水中的COD，去除率可达60%-80%。相比其他报道的用于污水处理的好氧反硝化细菌，本发明菌株对污水处理高效，24h后对硝态氮的去除率可达99.6%，脱氮速率可达22.6mg?L-1?h-1，其除氮效率是已报道菌株的1.51～4.57倍，可以单独使用或者固定化后应用于废水处理中，应用广泛。

权利要求书

1.一种好氧反硝化细菌，其特征在于：施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，CCTCC NO：M 2013488。

2.权利要求1所述的好氧反硝化细菌在污水处理中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，该好氧反硝化细菌用海藻酸钠进行固定。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，该好氧反硝化细菌用聚乙烯醇进行固定。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，该好氧反硝化细菌用海藻酸钠和聚乙烯醇进行固定。

说明书

一种好氧反硝化细菌及其在污水处理中的应用

技术领域

本发明属于环境微生物领域，具体涉及一种好氧反硝化细菌，还涉及该细菌在污水处理 中的应用。

背景技术

近年来，工业废水的大量排放以及农业大量施用化肥，导致氮素污染引起的水环境问题 日益突出，而其中硝酸盐污染问题尤为严重。硝酸盐及其衍生物因具有致病、致癌作用而影 响人类健康。因此，加大对污水中氮素污染的治理，尤其是提高硝酸盐氮的处理效率是目前 污水处理技术中亟待解决的问题。

生物反硝化脱氮是利用微生物的作用，在厌氧或缺氧条件下，以硝酸盐替代氧作电子受 体将硝酸盐逐步还原为气态产物脱除，是一种经济有效的脱氮方式。但往往由于受到厌氧和 缺氧条件的限制，生物脱氮过程进行的并不彻底。好氧反硝化菌的出现使得反硝化过程更容 易控制，其是利用好氧反硝化酶的作用，在有氧条件下进行反硝化作用的一类反硝化细菌。 自20世纪80年代，Robertson等(Robertson et al.Archives of Microbiology,1984,139,351-354) 在除硫和反硝化处理系统中首次分离出好氧反硝化菌以来，人们对于好氧反硝化菌的脱氮性 能已经进行了一定程度上的研究。然而已筛得的好氧反硝化菌大部分脱氮效率不高，一般在 溶解氧浓度较低时才会具有反硝化活性，因此，筛选分离出高效的好氧反硝化细菌菌株，并 将其应用于实际污水处理中，以节约脱氮成本，提高经济效益具有十分重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一株好氧反硝化细菌，该细菌已于2013年10月23日送往中国 典型培养物保藏中心进行保藏，分类命名：施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，保 藏编号：CCTCC NO：M2013488。该菌株具有高效脱除水体中硝酸盐氮的能力。

本发明的另一个目的在于提供了一株好氧反硝化细菌在污水处理中的应用，单独使用该 菌，或者将该菌进行固定化后投放到水体中，均可以有效地去除水体中的硝酸盐氮，且无亚 硝态氮的累积，并且除氮速度快。

为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：

一种好氧反硝化细菌，其筛选过程是：

(1)富集

于2013年5月从增氧型复合垂直流人工湿地小试系统两套系统中采集土壤样品，采样 深度为表层10cm。无菌条件下称量10g土壤接入500mL的液体培养基中进行富集，利用间 歇曝气法进行富集，间歇时间为12h，每次曝气3h，于30℃温箱培养，每五天转接一次， 富集时间1个月。测得硝态氮的去除率为99.9%，基本上没有亚硝氮的累积。

所述液体培养基为KNO32g，K2HPO41g，KH2PO41g，MgSO40.2g，柠檬酸 钠5g，微量盐溶液2mL;蒸馏水1000mL。

(2)初筛

采用涂布法将富集得到的菌悬液均匀涂布于BTB选择性培养基，30℃温箱培养3d后， 选取变蓝的菌落或晕圈作为初筛菌。

(3)复筛

将初筛的菌株接种于液体培养基，30℃，120r·min-1摇床培养5d，进行复筛。每24小 时利用格氏试剂、二苯胺试剂显色来检测硝酸盐的降解情况，选取去除效果好的菌株。

所述BTB培养基为：琼脂20g，KNO31g，KH2PO41g，FeCl2·6H2O0.5g，CaCl2·7H2O 0.2g，MgSO4·7H2O1g，琥珀酸钠8.5g，BTB(1%溶于酒精)1mL;蒸馏水1000mL，用 1mol·L-1NaOH调节pH至7.0～7.3。

通过综合比较硝态氮的去除率，亚硝态氮的累积量以及硝态氮的去除速率等指标，最终 从28株初筛菌中筛选出一株好氧反硝化细菌JH-1，其16SrRNA为SEQ ID NO.1所示。该 细菌已于2013年10月23日送往中国典型培养物保藏中心进行保藏，分类命名：施氏假单 胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，保藏编号：CCTCC NO：M2013488，地址：中国武汉 武汉大学。

JH-1为革兰氏阴性菌，为短杆菌，长为1.0um—1.5um,宽为0.2um—0,4um,无芽孢和鞭 毛，在固体培养基上形成不透明的白色菌落，菌落表面光滑，边缘整齐。

JH-1生理生化特性–酶活、碳源同化

+：阳性，-：阴性，

JH-1生理生化特性--酶活

+：阳性反应;-：阴性反应;W：弱阳性反应

一种好氧反硝化细菌在污水处理中的应用，其步骤是：

(1)将活化后的菌液接种于待处理的含氮废水中，投加量为受处理废水体积的5%，pH 范围为7.0-7.3，在摇床(30℃，120r/min)条件下，定时取样检测水样中硝态氮、COD的 去除率及亚硝态氮的累积量。

(2)用三种不同的基质包埋细菌获得固定化好氧反硝化细菌，并用于废水脱氮处理中

A、海藻酸钠固定法：称取4g海藻酸钠溶解到60mL的0.9%的生理盐水中，高温高压 (121℃，105-110kPa)灭菌冷却至室温(20-25℃)，与80mL好氧反硝化细菌悬浮液充分混 合，滴入4%w/v的CaCl2溶液中，冰浴，边滴边搅拌，使其形成直径为2mm的小球;将形 成的小球放置于4℃冰箱中交联固化12-24h后，用生理盐水洗涤2-3次备用。

B、聚乙烯醇固定法：配制60mL10%w/v的聚乙烯醇溶液，高温高压(121℃，105-110kPa) 灭菌冷却到室温(20-25℃)，与80mL好氧反硝化菌悬液充分混合，滴入饱和硼酸溶液中， 冰浴，边滴边搅拌，使其形成直径为2mm的小球;将形成的小球放置于4℃冰箱中交联固 化12-24h后，用生理盐水洗涤2-3次备用。

C、海藻酸钠和聚乙烯醇固定法：5%w/v聚乙烯醇和5%w/v的海藻酸钠的混合溶液60mL， 加热使其完全混合，高温高压灭菌(121℃，105-110kPa)，冷却至室温(20-25℃)，与80mL 好氧反硝化菌悬液充分混合;将此混合液用注射器挤入到4%w/v的CaCl2溶液中，冰浴， 边滴边搅拌，使其形成直径为2mm的小球;将形成的小球放置于4℃冰箱中交联固化11-13h， 用无菌水清洗小球，再放入饱和硼酸溶液中，于4℃冰箱中交联固化11-13h，用生理盐水洗 涤2-3次备用。

将A、B、C三步制得的好氧反硝化细菌小球从冰箱中取出，用双蒸水或者0.9%w/v的 生理盐水洗涤3-4次，然后浸泡在0.9%的生理盐水中，曝气约11-13h左右以活化固定化小 球，将一定量活化后的固定化小球填充到人工湿地模拟柱中，进行废水脱氮处理研究。

(3)于天然湖水中加入适量外加碳源柠檬酸钠，将经24h活化的施氏假单胞菌JH-1 按5%的接种量接入湖水中，摇床(30℃，120rpm)培养48h测定水体中硝态氮以及亚硝 态氮的量。

与现有技术相比，本发明具有如下优点和效果

本发明菌株可利用的碳源和氮源范围广泛，易于培养。

本发明菌株可用于处理高NO3-的废水，最高去除率可达99.6%，且无亚硝态氮的累积。

本发明菌株可同时去除有机废水中的COD，去除率可达60%-80%。

本发明菌株可以单独使用或者固定化后应用于废水处理中，应用广泛。

相比其他已发现的好氧反硝化细菌，菌株JH-1是一株非常高效的好氧反硝化细菌，24h 后对硝态氮的去除率可达99.6%，脱氮速率可达22.6mg·L-1·h-1，已报道分离出的好氧反硝化 菌其脱氮速率大多数在4.50～13.7mg·L-1·h-1。JH-1脱氮速率是这些菌的1.51～4.57倍。

8. 海藻酸钠能加工成什么样的食品

a．稳定性海藻酸钠用以代替淀粉、明胶作冰淇淋的稳定剂，可控制冰晶的形成，改善冰淇淋口感，也可稳定糖水冰糕、冰果子露、冰冻牛奶等混合饮料。许多乳制品，如精制奶酪、掼奶油、干奶酪等利用海藻酸钠的稳定作用可防止食品与包装物的连粘性，可作为上乳制饰品覆盖物，可使其稳定不变并防止糖霜酥皮开裂。
b：增稠与乳化性
海藻酸钠用于色拉(一种凉拌菜)调味汁，布丁(一种甜点心)、果酱、番茄酱及罐装制品的增稠剂，以提高制品的稳定性质，减少液体渗出。
c：水合性在挂面、粉丝、米粉制作中添加海藻酸钠可改善制品组织的粘结性，使其拉力强、弯曲度大、减少断头率，特别是对面筋含量较低面粉，效果更为明显。在面包、糕点等制品中添加海藻酸钠，可改善制品内部组织的均一性和持水作用，延长贮藏时间。在冷冻甜食制品中添加可提供热聚变保护层，改进香味逸散，提高熔点的性能。
d．胶凝性海藻酸钠可做成各种凝胶食品，保持良好的胶体形态，不发生渗液或收缩，适合用于冷冻食品和人造仿型食品。还可用来覆盖水果、肉、禽类和水产品作为保护层，与空气不直接接触，延长贮藏时间。还可作为面包的糖衣、加馅填料、点心的涂盖层、罐头食品等自凝形成剂。在高温、冷冻和酸性介质中仍可维持原有的形体。还可代替琼胶制成具有弹性，不粘牙，透明的水晶软糖。
产品的主要用途 1、长寿挂面：在挂面生产中，鲜条落地和酥条率是一个重要的指标，用海藻酸纳作添加剂生产的挂面，可以起到增强面粉的面筋值，改良面条组织的粘结力，使其拉力弯曲度大，减少断头绿率和湿面的回头率。食用时，面条耐煮、抗泡、不粘条、口感细腻、柔软爽口、无异味。
2、作为面包的添加剂：可以增强面粉的面筋值，增加面团的延伸性、韧性、弹性，这样面团可以保持大量的气体，制成的面包柔软有弹性、不掉渣。
3、营养蛋糕：蛋糕中添加海藻酸钠有助蛋浆的乳化作用，打擦时起泡性好，使蛋糕形成膨松的海棉组织，气孔细密均匀，富有弹性，耐干性好。
4、凝胶点心陷：用海藻酸钠代替果胶添加到点心、面包中的果子酱中，能提高制品的风味和营养价值，能防止因温度提高而溶化流浆，其成本只相当于果胶的三分之一。
5、海藻酸钠软糖：它利用海藻酸钠的成型特性，将钙离子添加到海藻酸钠溶液中，形成海藻酸钙凝胶而形成。
6、耐融化的冰糕、冰淇淋：海藻酸钠作为冰糕、冰淇淋的乳化稳定剂、增稠剂。
7、爽口的凉粉和果冻：海藻酸钠溶液中添加各种不同的果汁、蔗糖后与钙粒子形成的凝胶果冻在加热时不溶解，故可以煮沸灭菌。利用海藻酸钠与钙粒子形成的凝胶的特性可以制成透明柔韧，食用爽口的凉粉。
8、仿生食品：利用海藻酸钠与钙粒子形成的凝胶的特性可以制成人造蛰皮、鸡蛋、葡萄球等。
国家标准无使用限量，一般0.5-2%，但代价较高，慎重。

9. 酵母菌的固定化一般采用什么方法

大概的回忆，没有数据
海藻酸钠固定酵母细胞
一、准备
1.对于要用到的酵母前一天活化。（！）
2.用到的针筒、烧杯、玻棒等，事先灭菌。
二、操作
1.配海藻酸钠，称量，溶解，小火持续（！），或大火间断（！）。
2.配氯化钙溶液。
3.冷却至略温（！）（摸摸杯壁可知），加入活化的酵母液，搅拌。
4.用去掉针头的针筒吸。稀的海藻酸钠要加针头注射，浓的不用。
5.在离液面十来公分注射。
6.静置一段时间。（！）
三、结果
1.把海藻酸钠小球取出，蒸馏水反复冲洗。（！）
2.把小球放在葡萄糖溶液中，观察结果。
以下是网上的资料
《酵母细胞的固定化》教学设计
xx第一中学
xxx
20xx年x月xx日
xx:xx
一、实验原理
固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或者细胞固定在一定空间的技术，包括包埋法，化学结合法（将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上）和物理吸附法固定化，细胞多采用包埋法固定化。因为细胞个大，而酶分子很小，个大的细胞难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中露出。
常用的包埋载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维和聚丙烯酰胺等。本实验选用海藻酸钠作为载体包埋酵母菌细胞。
二、实验目的
1.了解细胞固定化的原理；
2.掌握酵母细胞固定化实验操作。
三、仪器与用具
水浴锅，20ml注射器，烧杯，三角瓶，玻璃棒，酵母悬液，海藻酸钠，无水氯化钙，葡萄糖
三、试剂配制
cacl2溶液：称取0.83g无水氯化钙加150ml水溶解待用；
海藻酸钠溶液：称取0.7g海藻酸钠加入10ml水加热溶液成糊状；
10%葡萄糖溶液：称取15g葡萄糖溶液溶于150ml水中。
四、实验方法与步骤
1.海藻酸钠溶液与酵母细胞混合：将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已经活化的酵母细胞，用玻璃棒充分搅拌混合均匀。
2.固定化酵母细胞：用20ml注射器吸取海藻酸钠与酵母细胞混合液，在恒定的高度（建议距液面12~15cm处，过低凝胶珠形状不规则，过高液体容易飞溅），缓慢将混合液滴加到cacl2中，观察液滴在cacl2溶液中形成凝胶珠的情形。将凝胶珠在cacl2溶液中浸泡30min
左右使其充分固定。
3.固定化酵母细胞发酵：用5ml移液器吸取蒸馏水冲洗固定好的凝胶珠2~3次，然后加入装有150ml10%葡萄糖溶液的三角瓶中，置于25℃发酵24h，观察结果。
实验开始时，凝胶球是沉在烧杯底部，24h后，凝胶球浮在溶液悬浮在上层，而且可以观察到凝胶球并不断产生气泡，说明固定化的酵母细胞正在利用溶液中的葡萄糖产生酒精和二氧化碳，结果凝胶球内包含的二氧化碳气泡使凝胶球悬浮于溶液上层。

10. 加热海藻酸钠太快

解析： 配制海藻酸钠溶液时，应该采用小火间断加热，促进溶解，加热太快，海藻酸钠会发生焦糊。答案： D