海藻酸鈉採用什麼方法滅菌

1. 海藻酸鈉的凝膠原理是什麼

海藻酸鈉遇到鈣離子可迅速發生離子交換，生成凝膠。利用這種性質，將海藻酸鹽溶液滴入含有鈣離子的水溶液中可產生海藻酸鈣膠球，使用噴嘴，可製造出凝膠纖維；

將含有鈣離子的水溶液加入海藻酸鹽溶液，可生成凝膠凍。海藻酸鈉與鈣離子形成的凝膠具有熱不可逆性。

(1)海藻酸鈉採用什麼方法滅菌擴展閱讀：

海藻酸鈉是從褐藻類的海帶或馬尾藻中提取碘和甘露醇之後的副產物，其分子由β-D-甘露糖醛酸（β-D-mannuronic，M）和α-L-古洛糖醛酸（α-L-guluronic，G）按（1→4）鍵連接而成。海藻酸鈉的水溶液具有較高的黏度，已被用作食品的增稠劑、穩定劑、乳化劑等。

海藻酸鈉是無毒食品，早在1938年就已被收入美國葯典。海藻酸鈉含有大量的—COO－，在水溶液中可表現出聚陰離子行為，具有一定的黏附性，可用作治療黏膜組織的 葯物載體。

在酸性條件下，—COO－轉變成—COOH，電離度降低，海藻酸鈉的親水性降低，分子鏈收縮，pH值增加時，—COOH基團不斷地解離，海藻酸鈉的親水性增加，分子鏈伸展。

因此，海藻酸鈉具有明顯的pH敏感性。海藻酸鈉可以在極其溫和的條件下快速形成凝膠，當有Ca2+、Sr2+等陽離子存在時，G單元上的Na+與二價陽離子發生離子交換反應，G單元堆積形成交聯網路結構，從而形成水凝膠。

海藻酸鈉形成凝膠的條件溫和，這可以避免敏感性葯物、蛋白質、細胞和酶等活性物質的失活。由於這些優良的特性，海藻酸鈉已經在食品工業和醫葯領域得到了廣泛應用。

優勢

海藻酸鈉作為飲料和乳品的增稠劑，在增稠方面有獨特的優勢：海藻酸鈉良好的流動性，使得添加後的飲品口感柔滑；並且可以防止產品消毒過程中的黏度下降現象。在利用海藻酸鈉作為增稠劑時，應盡量使用分子量較大的產品，適量添加Ca。可以大大提高海藻酸鈉的黏度。

海藻酸鈉是冰激凌等冷飲的高檔穩定劑，它可使冰淇淋等冷飲食品產生平滑的外觀、柔滑的口感。由於海藻酸鈣可形成穩定熱不可逆凝膠，因而在運輸、儲藏過程中不會變粗糙（冰晶生長），不會發生由於溫度波動而引起的冰淇淋變形現象；

同時這種冰淇淋食用時無異味，既提高了膨脹率又提高了融點，使得產品的質量和效益都有顯著提高。產品口感柔滑、細膩、口味良好。添加量較低，一般為1-3%，國外添加量為5-10%。

海藻酸鈉作為乳製品及飲料的穩定劑，穩定的冰凍牛乳具有良好的口感，無粘感和僵硬感，在攪拌時有粘性，並有遲滯感。

2. 關於海藻酸鈉得問題 急急急！！！ 100分懸賞

海藻酸鈉可以做石膏類塑型產品,可能是碰到金屬離子就凝固了.
你排查一下分散料吧,有沒有重鈣\金屬顏料\\\\?
以下資料對你可能有用:
牙科印模料
過去牙科印模主要用橡膠、石膏等混合物，近年來已被海藻酸鈉印模料代替，海藻酸鈉印模具有操作簡便， 印出的齒形准確等優點。海藻酸鈉印模料與凝固劑分裝兩包，使用時將兩者用水調合，數分鍾後即可凝固成型。
印花漿
海藻酸鈉用作經紗上漿、整理漿、印花漿等已有悠久的歷史，但主要用在印花漿方面。海藻酸鈉用作活性染 料色漿，具有獨特性能。纖維和活性染料進行化學反應，將染料固定在纖維上，在染色過程中所用印花漿應 不幹擾或參與化學反應鍵合。若色漿參與反應，就會固定在纖維上，這就造成染過的纖維手感發硬，變脆、 色澤不好。當使用海藻酸鈉作印花漿時，既不影響活性染料與纖維的染色過程，同時印出花紋清晰、鮮艷、 給色量高，手感好。不僅適合於棉布印色，也適用於羊毛、絲、合成纖維的印花。
中等粘度和低粘度的海藻酸鈉都適用於從篩網式印花到滾筒式印花色漿的要求。實際上用低粘度的海藻酸鈉 制備印花漿較穩定，這使制備較高含量的印花漿成為可能，這種印花漿可導致在乾燥過程中產生緻密的膜， 使著色率增加。

3. 海藻酸鈉固定化酶成敗關鍵

A、利用固定化酶降解水體中有機磷農葯，純粹的化學反應，不需要提供營養條件，只需適宜的溫度和PH值即可，A錯誤；
B、影響固定化酵母細胞實驗成敗的關鍵在於配製海藻酸鈉溶液，B錯誤；
C、如果提取動物細胞中的DNA和蛋白質可以用蒸餾水漲破細胞，但是如果用植物細胞來提取DNA，那麼用蒸餾水就無法漲破細胞，C錯誤；
D、檢測土壤中細菌總數的實驗過程中需要嚴格的滅菌處理，防止影響實驗的結果，D正確．
故選：D．

4. 溶解海藻酸鈉最好採用什麼或什麼辦法怎麼溶解海藻酸鈉

1、先用分散劑分散再溶解、可以溶解快一些。海藻酸鈉易溶於水,只是塊狀的海藻酸鈉溶解速度較慢,可以在溶解前使海藻酸鈉變成粉末,為加速溶解,可採用熱水溶解,並在溶解過程中不斷攪拌。
2、海藻酸鈉是從褐藻類的海帶或馬尾藻中提取碘和甘露醇之後的副產物，其分子由β-D-甘露糖醛酸（β-D-mannuronic，M）和α-L-古洛糖醛酸（α-L-guluronic，G）按（1→4）鍵連接而成。海藻酸鈉的水溶液具有較高的黏度，已被用作食品的增稠劑、穩定劑、乳化劑等。海藻酸鈉是無毒食品，早在1938年就已被收入美國葯典。海藻酸鈉含有大量的—COO－，在水溶液中可表現出聚陰離子行為，具有一定的黏附性，可用作治療黏膜組織的葯物載體。在由於優良的特性，海藻酸鈉已經在食品工業和醫葯領域得到了廣泛應用。

5. 生物選修1細胞的固定化 海藻酸鈉是多孔性載體材料，在製作載體的時候，是先形成孔還是加了酵母菌液後再

見別人做過，記得是這樣的。
先將海藻酸鈉按需要量放在水裡，加熱，讓海藻酸鈉溶解在水中，調配好PH值，滅菌。冷卻到合適的溫度。
配製好氯化鈣溶液（濃度忘了），滅菌後冷卻。在無菌操作台上，把滅菌的氯化鈣溶液倒入燒杯中，放入小攪拌棒，把燒杯到電磁攪拌器上。
將酵母菌液（或別的菌液）加入到海藻酸鈉液里，混合均勻，用不帶針頭的注射器吸取海藻酸鈉菌液，一滴一滴地滴入氯化鈣溶液中，同時開動電磁攪拌器。海藻酸鈉菌液在氯化鈣溶液中冷卻凝固，並在鈣離子作用下，形成具有一定強度的圓球形凝膠。
固定化細胞就做好了。

6. 海藻酸鈉怎樣消毒,在生物細胞培養固定細胞

放在熱水中溶解，溶解效果不好，但會成團狀物
海藻酸鈉是增稠劑最好用去離子水溶解，但清水也可以。關鍵是雖然攪拌，一般建議你放在清水沉澱幾天再用，絕對沒問題。而且不存在團狀物。

7. 反硝化細菌主要用於處理怎樣的水質問題

摘要

本發明公開了一種好氧反硝化細菌及其在污水處理中的應用，申請人通過富集從濕地中篩選出一種好氧反硝化細菌，施氏假單胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，CCTCC NO：M2013488。該細菌可用於處理高NO3-的廢水，最高去除率可達99.6%，且無亞硝態氮的累積，並可同時去除有機廢水中的COD，去除率可達60%-80%。相比其他報道的用於污水處理的好氧反硝化細菌，本發明菌株對污水處理高效，24h後對硝態氮的去除率可達99.6%，脫氮速率可達22.6mg?L-1?h-1，其除氮效率是已報道菌株的1.51～4.57倍，可以單獨使用或者固定化後應用於廢水處理中，應用廣泛。

權利要求書

1.一種好氧反硝化細菌，其特徵在於：施氏假單胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，CCTCC NO：M 2013488。

2.權利要求1所述的好氧反硝化細菌在污水處理中的應用。

3.根據權利要求2所述的應用，其特徵在於，該好氧反硝化細菌用海藻酸鈉進行固定。

4.根據權利要求2所述的應用，其特徵在於，該好氧反硝化細菌用聚乙烯醇進行固定。

5.根據權利要求2所述的應用，其特徵在於，該好氧反硝化細菌用海藻酸鈉和聚乙烯醇進行固定。

說明書

一種好氧反硝化細菌及其在污水處理中的應用

技術領域

本發明屬於環境微生物領域，具體涉及一種好氧反硝化細菌，還涉及該細菌在污水處理 中的應用。

背景技術

近年來，工業廢水的大量排放以及農業大量施用化肥，導致氮素污染引起的水環境問題 日益突出，而其中硝酸鹽污染問題尤為嚴重。硝酸鹽及其衍生物因具有致病、致癌作用而影 響人類健康。因此，加大對污水中氮素污染的治理，尤其是提高硝酸鹽氮的處理效率是目前 污水處理技術中亟待解決的問題。

生物反硝化脫氮是利用微生物的作用，在厭氧或缺氧條件下，以硝酸鹽替代氧作電子受 體將硝酸鹽逐步還原為氣態產物脫除，是一種經濟有效的脫氮方式。但往往由於受到厭氧和 缺氧條件的限制，生物脫氮過程進行的並不徹底。好氧反硝化菌的出現使得反硝化過程更容 易控制，其是利用好氧反硝化酶的作用，在有氧條件下進行反硝化作用的一類反硝化細菌。 自20世紀80年代，Robertson等(Robertson et al.Archives of Microbiology,1984,139,351-354) 在除硫和反硝化處理系統中首次分離出好氧反硝化菌以來，人們對於好氧反硝化菌的脫氮性 能已經進行了一定程度上的研究。然而已篩得的好氧反硝化菌大部分脫氮效率不高，一般在 溶解氧濃度較低時才會具有反硝化活性，因此，篩選分離出高效的好氧反硝化細菌菌株，並 將其應用於實際污水處理中，以節約脫氮成本，提高經濟效益具有十分重要的意義。

發明內容

本發明的目的在於提供一株好氧反硝化細菌，該細菌已於2013年10月23日送往中國 典型培養物保藏中心進行保藏，分類命名：施氏假單胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，保 藏編號：CCTCC NO：M2013488。該菌株具有高效脫除水體中硝酸鹽氮的能力。

本發明的另一個目的在於提供了一株好氧反硝化細菌在污水處理中的應用，單獨使用該 菌，或者將該菌進行固定化後投放到水體中，均可以有效地去除水體中的硝酸鹽氮，且無亞 硝態氮的累積，並且除氮速度快。

為了達到上述目的，本發明採取以下技術措施：

一種好氧反硝化細菌，其篩選過程是：

(1)富集

於2013年5月從增氧型復合垂直流人工濕地小試系統兩套系統中採集土壤樣品，采樣 深度為表層10cm。無菌條件下稱量10g土壤接入500mL的液體培養基中進行富集，利用間 歇曝氣法進行富集，間歇時間為12h，每次曝氣3h，於30℃溫箱培養，每五天轉接一次， 富集時間1個月。測得硝態氮的去除率為99.9%，基本上沒有亞硝氮的累積。

所述液體培養基為KNO32g，K2HPO41g，KH2PO41g，MgSO40.2g，檸檬酸 鈉5g，微量鹽溶液2mL;蒸餾水1000mL。

(2)初篩

採用塗布法將富集得到的菌懸液均勻塗布於BTB選擇性培養基，30℃溫箱培養3d後， 選取變藍的菌落或暈圈作為初篩菌。

(3)復篩

將初篩的菌株接種於液體培養基，30℃，120r·min-1搖床培養5d，進行復篩。每24小 時利用格氏試劑、二苯胺試劑顯色來檢測硝酸鹽的降解情況，選取去除效果好的菌株。

所述BTB培養基為：瓊脂20g，KNO31g，KH2PO41g，FeCl2·6H2O0.5g，CaCl2·7H2O 0.2g，MgSO4·7H2O1g，琥珀酸鈉8.5g，BTB(1%溶於酒精)1mL;蒸餾水1000mL，用 1mol·L-1NaOH調節pH至7.0～7.3。

通過綜合比較硝態氮的去除率，亞硝態氮的累積量以及硝態氮的去除速率等指標，最終 從28株初篩菌中篩選出一株好氧反硝化細菌JH-1，其16SrRNA為SEQ ID NO.1所示。該 細菌已於2013年10月23日送往中國典型培養物保藏中心進行保藏，分類命名：施氏假單 胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，保藏編號：CCTCC NO：M2013488，地址：中國武漢 武漢大學。

JH-1為革蘭氏陰性菌，為短桿菌，長為1.0um—1.5um,寬為0.2um—0,4um,無芽孢和鞭 毛，在固體培養基上形成不透明的白色菌落，菌落表面光滑，邊緣整齊。

JH-1生理生化特性–酶活、碳源同化

+：陽性，-：陰性，

JH-1生理生化特性--酶活

+：陽性反應;-：陰性反應;W：弱陽性反應

一種好氧反硝化細菌在污水處理中的應用，其步驟是：

(1)將活化後的菌液接種於待處理的含氮廢水中，投加量為受處理廢水體積的5%，pH 范圍為7.0-7.3，在搖床(30℃，120r/min)條件下，定時取樣檢測水樣中硝態氮、COD的 去除率及亞硝態氮的累積量。

(2)用三種不同的基質包埋細菌獲得固定化好氧反硝化細菌，並用於廢水脫氮處理中

A、海藻酸鈉固定法：稱取4g海藻酸鈉溶解到60mL的0.9%的生理鹽水中，高溫高壓 (121℃，105-110kPa)滅菌冷卻至室溫(20-25℃)，與80mL好氧反硝化細菌懸浮液充分混 合，滴入4%w/v的CaCl2溶液中，冰浴，邊滴邊攪拌，使其形成直徑為2mm的小球;將形 成的小球放置於4℃冰箱中交聯固化12-24h後，用生理鹽水洗滌2-3次備用。

B、聚乙烯醇固定法：配製60mL10%w/v的聚乙烯醇溶液，高溫高壓(121℃，105-110kPa) 滅菌冷卻到室溫(20-25℃)，與80mL好氧反硝化菌懸液充分混合，滴入飽和硼酸溶液中， 冰浴，邊滴邊攪拌，使其形成直徑為2mm的小球;將形成的小球放置於4℃冰箱中交聯固 化12-24h後，用生理鹽水洗滌2-3次備用。

C、海藻酸鈉和聚乙烯醇固定法：5%w/v聚乙烯醇和5%w/v的海藻酸鈉的混合溶液60mL， 加熱使其完全混合，高溫高壓滅菌(121℃，105-110kPa)，冷卻至室溫(20-25℃)，與80mL 好氧反硝化菌懸液充分混合;將此混合液用注射器擠入到4%w/v的CaCl2溶液中，冰浴， 邊滴邊攪拌，使其形成直徑為2mm的小球;將形成的小球放置於4℃冰箱中交聯固化11-13h， 用無菌水清洗小球，再放入飽和硼酸溶液中，於4℃冰箱中交聯固化11-13h，用生理鹽水洗 滌2-3次備用。

將A、B、C三步製得的好氧反硝化細菌小球從冰箱中取出，用雙蒸水或者0.9%w/v的 生理鹽水洗滌3-4次，然後浸泡在0.9%的生理鹽水中，曝氣約11-13h左右以活化固定化小 球，將一定量活化後的固定化小球填充到人工濕地模擬柱中，進行廢水脫氮處理研究。

(3)於天然湖水中加入適量外加碳源檸檬酸鈉，將經24h活化的施氏假單胞菌JH-1 按5%的接種量接入湖水中，搖床(30℃，120rpm)培養48h測定水體中硝態氮以及亞硝 態氮的量。

與現有技術相比，本發明具有如下優點和效果

本發明菌株可利用的碳源和氮源范圍廣泛，易於培養。

本發明菌株可用於處理高NO3-的廢水，最高去除率可達99.6%，且無亞硝態氮的累積。

本發明菌株可同時去除有機廢水中的COD，去除率可達60%-80%。

本發明菌株可以單獨使用或者固定化後應用於廢水處理中，應用廣泛。

相比其他已發現的好氧反硝化細菌，菌株JH-1是一株非常高效的好氧反硝化細菌，24h 後對硝態氮的去除率可達99.6%，脫氮速率可達22.6mg·L-1·h-1，已報道分離出的好氧反硝化 菌其脫氮速率大多數在4.50～13.7mg·L-1·h-1。JH-1脫氮速率是這些菌的1.51～4.57倍。

8. 海藻酸鈉能加工成什麼樣的食品

a．穩定性海藻酸鈉用以代替澱粉、明膠作冰淇淋的穩定劑，可控製冰晶的形成，改善冰淇淋口感，也可穩定糖水冰糕、冰果子露、冰凍牛奶等混合飲料。許多乳製品，如精製乳酪、摜奶油、干乳酪等利用海藻酸鈉的穩定作用可防止食品與包裝物的連粘性，可作為上乳制飾品覆蓋物，可使其穩定不變並防止糖霜酥皮開裂。
b：增稠與乳化性
海藻酸鈉用於色拉(一種涼拌菜)調味汁，布丁(一種甜點心)、果醬、番茄醬及罐裝製品的增稠劑，以提高製品的穩定性質，減少液體滲出。
c：水合性在掛面、粉絲、米粉製作中添加海藻酸鈉可改善製品組織的粘結性，使其拉力強、彎曲度大、減少斷頭率，特別是對麵筋含量較低麵粉，效果更為明顯。在麵包、糕點等製品中添加海藻酸鈉，可改善製品內部組織的均一性和持水作用，延長貯藏時間。在冷凍甜食製品中添加可提供熱聚變保護層，改進香味逸散，提高熔點的性能。
d．膠凝性海藻酸鈉可做成各種凝膠食品，保持良好的膠體形態，不發生滲液或收縮，適合用於冷凍食品和人造仿型食品。還可用來覆蓋水果、肉、禽類和水產品作為保護層，與空氣不直接接觸，延長貯藏時間。還可作為麵包的糖衣、加餡填料、點心的塗蓋層、罐頭食品等自凝形成劑。在高溫、冷凍和酸性介質中仍可維持原有的形體。還可代替瓊膠製成具有彈性，不粘牙，透明的水晶軟糖。
產品的主要用途 1、長壽掛面：在掛面生產中，鮮條落地和酥條率是一個重要的指標，用海藻酸納作添加劑生產的掛面，可以起到增強麵粉的麵筋值，改良面條組織的粘結力，使其拉力彎曲度大，減少斷頭綠率和濕面的回頭率。食用時，面條耐煮、抗泡、不粘條、口感細膩、柔軟爽口、無異味。
2、作為麵包的添加劑：可以增強麵粉的麵筋值，增加面團的延伸性、韌性、彈性，這樣面團可以保持大量的氣體，製成的麵包柔軟有彈性、不掉渣。
3、營養蛋糕：蛋糕中添加海藻酸鈉有助蛋漿的乳化作用，打擦時起泡性好，使蛋糕形成膨鬆的海棉組織，氣孔細密均勻，富有彈性，耐乾性好。
4、凝膠點心陷：用海藻酸鈉代替果膠添加到點心、麵包中的果子醬中，能提高製品的風味和營養價值，能防止因溫度提高而溶化流漿，其成本只相當於果膠的三分之一。
5、海藻酸鈉軟糖：它利用海藻酸鈉的成型特性，將鈣離子添加到海藻酸鈉溶液中，形成海藻酸鈣凝膠而形成。
6、耐融化的冰糕、冰淇淋：海藻酸鈉作為冰糕、冰淇淋的乳化穩定劑、增稠劑。
7、爽口的涼粉和果凍：海藻酸鈉溶液中添加各種不同的果汁、蔗糖後與鈣粒子形成的凝膠果凍在加熱時不溶解，故可以煮沸滅菌。利用海藻酸鈉與鈣粒子形成的凝膠的特性可以製成透明柔韌，食用爽口的涼粉。
8、仿生食品：利用海藻酸鈉與鈣粒子形成的凝膠的特性可以製成人造蟄皮、雞蛋、葡萄球等。
國家標准無使用限量，一般0.5-2%，但代價較高，慎重。

9. 酵母菌的固定化一般採用什麼方法

大概的回憶，沒有數據
海藻酸鈉固定酵母細胞
一、准備
1.對於要用到的酵母前一天活化。（！）
2.用到的針筒、燒杯、玻棒等，事先滅菌。
二、操作
1.配海藻酸鈉，稱量，溶解，小火持續（！），或大火間斷（！）。
2.配氯化鈣溶液。
3.冷卻至略溫（！）（摸摸杯壁可知），加入活化的酵母液，攪拌。
4.用去掉針頭的針筒吸。稀的海藻酸鈉要加針頭注射，濃的不用。
5.在離液面十來公分注射。
6.靜置一段時間。（！）
三、結果
1.把海藻酸鈉小球取出，蒸餾水反復沖洗。（！）
2.把小球放在葡萄糖溶液中，觀察結果。
以下是網上的資料
《酵母細胞的固定化》教學設計
xx第一中學
xxx
20xx年x月xx日
xx:xx
一、實驗原理
固定化酶和固定化細胞技術是利用物理或化學方法將酶或者細胞固定在一定空間的技術，包括包埋法，化學結合法（將酶分子或細胞相互結合，或將其結合到載體上）和物理吸附法固定化，細胞多採用包埋法固定化。因為細胞個大，而酶分子很小，個大的細胞難以被吸附或結合，而個小的酶容易從包埋材料中露出。
常用的包埋載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維和聚丙烯醯胺等。本實驗選用海藻酸鈉作為載體包埋酵母菌細胞。
二、實驗目的
1.了解細胞固定化的原理；
2.掌握酵母細胞固定化實驗操作。
三、儀器與用具
水浴鍋，20ml注射器，燒杯，三角瓶，玻璃棒，酵母懸液，海藻酸鈉，無水氯化鈣，葡萄糖
三、試劑配製
cacl2溶液：稱取0.83g無水氯化鈣加150ml水溶解待用；
海藻酸鈉溶液：稱取0.7g海藻酸鈉加入10ml水加熱溶液成糊狀；
10%葡萄糖溶液：稱取15g葡萄糖溶液溶於150ml水中。
四、實驗方法與步驟
1.海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合：將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加入已經活化的酵母細胞，用玻璃棒充分攪拌混合均勻。
2.固定化酵母細胞：用20ml注射器吸取海藻酸鈉與酵母細胞混合液，在恆定的高度（建議距液面12~15cm處，過低凝膠珠形狀不規則，過高液體容易飛濺），緩慢將混合液滴加到cacl2中，觀察液滴在cacl2溶液中形成凝膠珠的情形。將凝膠珠在cacl2溶液中浸泡30min
左右使其充分固定。
3.固定化酵母細胞發酵：用5ml移液器吸取蒸餾水沖洗固定好的凝膠珠2~3次，然後加入裝有150ml10%葡萄糖溶液的三角瓶中，置於25℃發酵24h，觀察結果。
實驗開始時，凝膠球是沉在燒杯底部，24h後，凝膠球浮在溶液懸浮在上層，而且可以觀察到凝膠球並不斷產生氣泡，說明固定化的酵母細胞正在利用溶液中的葡萄糖產生酒精和二氧化碳，結果凝膠球內包含的二氧化碳氣泡使凝膠球懸浮於溶液上層。

10. 加熱海藻酸鈉太快

解析： 配製海藻酸鈉溶液時，應該採用小火間斷加熱，促進溶解，加熱太快，海藻酸鈉會發生焦糊。答案： D